Manipulación de la Mycobacterium Tuberculosis (MTB) en laboratorio Nivel III

OBJETIVO / ANTECEDENTES: Directrices para la manipulación de Mycobacterium tuberculosis (MTB) culturas que requieren una infraestructura de bioseguridad de nivel 3 (BSL-3) y el código de conducta anexo. En este estudio, que tuvo como objetivo validar y aplicar métodos de detección de micobacterias viables de las superficies en un laboratorio BSL-3 MTB.
MÉTODOS: Se evaluó fenotípica (Replicar Detección Organismo y Contando [RODAC] placas) y molecular (propidio monoazida [PMA] reacción en cadena de la polimerasa basada [PCR]) se acerca para la detección de micobacterias viables, así como el efecto de etanol al 70% aplicado durante 5 min para la desinfección contra las micobacterias. Para la validación del método, se midió la recuperación de diluciones en serie de Mycobacterium bovis bacilo de Calmette-Guérin de portaobjetos de vidrio. Posteriormente, se sellaron las superficies correspondiente  y alrededor de la cabina de bioseguridad (BSC) después de que diferentes técnicos habían manipulado suspensiones bacterianas de alta carga para las pruebas de susceptibilidad a fármacos de rutina en un BSC de clase II.
RESULTADOS: RODAC estampación podría detectar hasta tres bacterias en portaobjetos estampadas ya sea 5 minutos o 60 minutos después de la inoculación. PCR basada en la PMA, probado en paralelo, no pasa la validación. Micobacterias todavía se detectaron después de 5 min de la desinfección con etanol al 70%. En el BSL-3, a partir de 201 superficies estampadas-RODAC, MTB se detectó en cuatro: tres dentro de una tapa de BSC-en un tubo y en los guantes-y de un operador uno exterior, en el vestido de un operador.
CONCLUSIÓN: placas RODAC para detectar micobacterias en un bajo número de microorganismos. Además, este método nos permitió demostrar que el etanol a  70% no es FIABLE para matar las  micobacterias cuando se aplica durante 5 minutos a una superficie de secado, y que los bacilos MTB puede llegar fuera de un BSC de clase II durante la práctica de rutina, aunque la ruta no podría ser documentada.
Fuente:
Daneau G, et al. El uso de placas RODAC para medir la contención de Mycobacterium tuberculosis en una cabina de bioseguridad de clase II B durante las operaciones de rutina. Int J Mycobacteriol. 2016 Jun; 5 (2): 148-54.